royal88

| 成果概况

目前尚未有研究将CRISPR-Cas9技术应用于大型真菌或药用真菌育种领域。本项目所得成果即从此处着手，利用该技术成功对灵芝实现了基因编辑，并通过分子生物学手段确定该突变可稳定遗传，得到了灵芝抗苯丙咪唑类杀菌剂新品种。另外，本成果也为利用CRISPR-Cas9技术对大型真菌或药用真菌进行基因编辑提供了解决方案。所得成果从基因水平对灵芝进行品种改良，选育出能够抗苯并咪唑类杀菌剂的灵芝品种，以此避免使用杀菌剂对灵芝造成的危害，促进灵芝增产增收，加快灵芝产业化栽培的进程。

图1　将编辑得到的菌株在含有苯并咪唑杀菌剂的PDA培养基中传代培养。
（A）6个菌株可在培养基中正常生长；
（B）其他菌株不能再生或；
（C）缓慢生长并在一段时间后停止生长。

图2　利用分子生物学手段检测基因编辑结果。
（A）利用T7E1酶进行酶切；
（B）一代测序检测突变位点。

| 成果成熟度

试验室成果。

| 应用领域及市场前景

本项目所得成果可应用于药用真菌灵芝基因编辑领域，或应用于药用真菌灵芝栽培领域。本项目所得成果为利用CRISPR-Cas9技术对大型真菌或药用真菌进行基因编辑提供了解决方案，同时解决了灵芝在栽培过程中面临的杂菌污染问题，应用前景乐观，所得新品种适合在灵芝栽培中进行推广。

| 合作方式

合作开发、技术转让。